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技術文章

Technical articles

2014
9-25

小牛血清使用注意事項以及正確的凍存方法
使用小牛血清時的注意事項具體如下：1.供血的新生小牛必須是健康牛的產仔，并在產后24小時內抽血，此期間不得吸取母乳。2.以無菌操作自頸動脈放血，并在無菌條件下分離血清及濾菌，全過程在36小時內完成。經濾菌的血清登一20IC保存。3.血清使用前需做細蔭、支原體培養及內毒素測定，在確實無污染的情況下方可使用。4.每批小牛血清測定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎培養墓和HAT培養墓中，對骨髓瘤細胞和雜交瘤細胞進行培養，觀察小牛血清對瘤細胞和融合細胞的細胞毒性。若在2...
2014
9-23

根據歷史起源來談“植物組織培養應用前景”
19世紀30年代，德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創立了細胞學說，根據這一學說，如果給細胞提供和生物體內一樣的條件，每個細胞都應該能夠獨立生活；1902年，德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結果，證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-23

根據歷史起源來談“植物組織培養應用前景
19世紀30年代，德國植物學施萊登和德國動物學家施旺創立了細胞學說，根據這一學說，如果給細胞提供和生物體內一樣的條件，每個細胞都應該能夠獨立生活；1902年，德國植物學家哈伯蘭特細胞性的理論是植物組培的理論基礎。1958年，一個振奮人心的消息從美國傳向世界各地，美國植物學家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細胞進行培養，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結果，證實了哈伯蘭特在五十多年前關于細胞的預言。植物組培的簡單過程如下：剪接植物器官或組織——經過脫分化（也叫去分化）形成...
2014
9-16

ELISA法細胞凋亡檢測操作步驟
細胞凋亡的發生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進入核小體間切割DNA,產生180bp～200bp或其倍數的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復合物而不被核酸內切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結構，可特異性檢測細胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細胞，離心后，用200µl溶細胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養細胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測樣...
2014
9-9

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關介紹
胰島素是由胰島B細胞受內源性或外源性物質如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質激素。胰島素是機體內*降低血糖的激素，同時促進糖原、脂肪、蛋白質合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯免疫吸附技術，應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標記的胰島素（INS）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯...
2014
9-3

探討“ELISA實驗重復性不佳及出現白板、陽性對照不顯色”
（一）、重復性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數量多少不一，加樣時間有長有短。重復某一樣品時，加樣時間盡可能與*次接近2.保溫時間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復測定標本，操作條件、人員等應盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現白板，陽性對照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請按說明書所示稀釋倍數配制。3.未加酶結合物而認為...
2014
9-1

在同一條件下做WB實驗為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？
近期恒遠經常接到客戶的：同一條件下，除了測的指標不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？上海恒遠技術分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：1、你是否兩張膜上都設有陽性對照？如果有，一張膜有信號，一張沒信號，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結合底物會不會有問題，即沒有充分結合好，或者結合時間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應液，（3）、就是沒有信號的膜會不會壓片時間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，...
2014
8-18

ELISA實驗加樣步驟不當可能會影響實驗結果及解決方法
ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床跟科研得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節操作不當可能會對實驗的檢測結果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。現我公司技術人員將加樣操作中常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以便給同行帶來一些啟發，提高試驗質量：加樣可能原因：1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣；2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)；3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。解決辦法：1)標本為血清：將血液...

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